• Título:  INFECCIÓN POR ACTINOBACILLUS PLEUROPNEUMONIAE EN UN MODELO MURINO
• Autor:  Monter Flores, José Luis
• Universidad:  Universidad de León
• Departamento:  Sanidad animal
• Fecha de Lectura:  30/04/2010
• Programa de doctorado:  SANIDAD ANIMAL
• Dirección: 
  • Gutierrez Martín, Cesar Bernardo (DIRECTOR)
  • RODRÍGUEZ FERRI, ELÍAS FERNANDO (DIRECTOR)
• Tribunal: 
  • VADILLO MACHOTA, SANTIAGO (PRESIDENTE)
  • RODRÍGUEZ BARBOSA, JOSÉ IGNACIO (SECRETARIO)
  • GOYACHE GOÑI, JOAQUÍN (VOCAL)
  • CARO VERGARA, MARIA ROSA (VOCAL)
  • GONZÁLEZ LLAMAZARES, OSCAR R. (VOCAL)
• Descriptores: 
  • MICROBIOLOGIA
  • ENFERMEDADES INFECCIOSAS
• Localización:  BIBLIOTECA UNIVERSITARIA SAN ISIDORO
• Resumen:
  Actinobacillus pleuropneumoniae es un microorganismo de gran interés en patología porcina, el agente causal de la pleuroneumonía, una enfermedad que afecta a todas las edades, especialmente en las fases de transición y cebo, produciendo importantes pérdidas económicas y niveles de mortalidad elevados en brotes agudos. A. pleuropneumoniae es un agente específico del cerdo y hasta la fecha se carece de un modelo experimental adecuado. El ratón ha sido propuesto como especie conveniente para la enfermedad aguda reproduciendo las lesiones que se observan en el hospedador natural, principalmente debidas a las potentes toxinas RTX (Apx I IV) producidas por el microorganismo, pero no en el caso de la enfermedad crónica, pues el sistema defensivo del animal resuelve la infección, en unas pocas horas o días. En este trabajo se revisa la relación existente entre la resistencia natural de la especie murina y los parámetros que ordinariamente condicionan la supervivencia y multiplicación de A. pleuropneumoniae en el hospedador natural; el abastecimiento de hierro, la capacidad bactericida del suero (sistema del complemento) y la participación de la población de PMN. Utilizando parte de la información derivada de los ensayos realizados se valoro en el ratón la eficacia de una bacterina conjugada con proteínas Tbp en la protección frente al desafío con una dosis letal y otra subletal de A. pleuropneumoniae. Los estudios relacionados con la supervivencia de A. pleuropneumoniae en el ratón se llevaron a cabo utilizando una dosis subletal administrada intranasalmente a ratones NMRI y BALB/c en un total de 19 ensayos que incluyeron 328 ratones. Como resultado general pudo establecerse que A. pleuropenumoniae es aclarado del pulmón en un tiempo de entre 24 y 144 horas. Se llevaron a cabo ensayos para determinar el efecto sobre la supervivencia de A. pleuropneumoniae, de 3 dosis de transferrina porcina saturada en hierro (50, 100 y 400 µg/ml) para lo cual se realizaron un total de 24 pruebas distribuidas en 4 ensayos (a razón de 5 pruebas con 50 µg, 4 con 100 µg, 5 con 400 µg y 10 con 100 µg de transferrina cargada con hierro, (estos últimos en ratones BALB/c SPF y los anteriores en NMRI) utilizando un total de 342 ratones a los que se administró la transferrina 2 horas antes de la infección, por vía intranasal. De las tres concentraciones, se optó por la concentración intermedia que logró mantener la supervivencia de los animales por encima de las 216 horas e incrementos pasajeros en las primeras 12-24 horas y en los porcentajes de supervivencia a las 216 horas. De ello se dedujo la influencia de la transferrina tanto en la supervivencia como en la multiplicación, evidente, de las bacterias en las primeras horas y por otro lado, la prolongación del periodo de eliminación de hasta más de 216 horas. La influencia de la actividad del complemento en la susceptibilidad o resistencia de los ratones NMRI frente a A. pleuropneumoniae en el ratón se analizó mediante un tratamiento con tres diferentes dosis de veneno de cobra en un total de 18 pruebas distribuidas en 3 experimentos, una dosis inicial de 0,0750 mg/kg y 2 dosis de mantenimiento una de 0,0187 mg/kg y otra de 0,0357 mg/kg de veneno de cobra, administradas en diferentes tiempos, entre las 0 y 172 horas, observando que la descomplementación del ratón con veneno de cobra en diversas combinaciones antes de la infección, simultáneamente con ella y después, no produce cambios destacables respecto al grupo control de la infección. De ello se deduce que el complemento no representa una barrera esencial en la infección por A. pleuropneumoniae, que probablemente se debe a la existencia de una capsula bien organizada y gruesa en todos los serotipos y especialmente en el serotipo 1 con el que se llevaron a cabo los estudios. En relación con la actividad de los PMN del ratón y su influencia en la resistencia natural a la infección por A. pleuropneumoniae se llevó a cabo un ensayo con 6 diferentes grupos de ratones (de prueba y controles un total de 180 ratones) que fueron estudiados en un periodo de 15 días, a los que se sometió a un tratamiento con el AcMc Ly-6G, que depleciona esta población sanguínea, siendo después infectados y según el grupo, administrados intranasalmente con transferrina porcina (100 µg). Se pudo observar un mayor efecto en el grupo de animales inoculados con el anticuerpo monoclonal e infectados, lo que pone de manifiesto la importancia de los PMN en la resistencia natural de esta especie animal al microorganismo. Finalmente, con una bacterina elaborada a partir del serotipo 1 de A. pleuropneumoniae enriquecida en toxinas Apx inactivadas y TbpB, se llevó a cabo un ensayo de protección en ratones NMRI vacunados (dos dosis) y desafiados con una dosis subletal (primer estudio) y letal (segundo estudio) de A. pleuropneumoniae (serotipo homólogo) administrado por vía intranasal, en ambos casos, previa administración de 100 µg de transferrina porcina saturada con hierro. En el primer caso, la supervivencia de A. pleuropneumonie se prolongo más de diez días, respecto de las 8 de los controles no vacunados, una diferencia que se estima escasa, toda vez que los niveles de Anticuerpos eran elevados. En el segundo experimento, al desafiar con una dosis letal de A. pleuropneumoniae (2,88 x 107 ufc) si que se pone de manifiesto la capacidad protectora de la vacuna, que protege de la mortalidad en los animales vacunados respecto de los controles no vacunados, aunque no de la condición de portador (supervivencia de A. pleuropenumoniae) que se prolonga hasta el límite de los diez días, una situación que coincide con los resultados de vacunación con bacterinas que habitualmente se observa en el hospedador natural.