• Título:  INTERACCIÓN DEL ANTIHELMÍNTICO TRICLABENDAZOL, EL ANALGÉSICO URB937 Y SUS DERIVADOS CON TRANSPORTADORES DE MEMBRANA DEPENDIENTES DE ATP
• Autor:  Barrera Cuesta, Borja
• Universidad:  Universidad de León
• Departamento:  Ciencias biomédicas
• Fecha de Lectura:  15/11/2013
• Mención Europeo / Mención Internacional: concedido
• Programa de doctorado:  Biomedicina
• Dirección: 
  • MERINO PELÁEZ, GRACIA (CODIRECTOR)
  • PRIETO FERNANDEZ, JULIO (CODIRECTOR)
• Tribunal: 
  • Marzo Pérez, Florencio (PRESIDENTE)
  • ÁLVAREZ DE FELIPE, ANA ISABEL (SECRETARIO)
  • Vlaming, Maria Louise Hubertina (VOCAL)
• Descriptores: 
  • DISEÑO SINTESIS Y ESTUDIO DE NUEVOS FARMACOS
  • ABSORCION DE LOS FARMACOS
  • ANALISIS DE FARMACOS
  • MECANISMOS DE ACCION DE LOS FARMACOS
• Localización:  BIBLIOTECA UNIVERSITARIA SAN ISIDORO
• 2013barreinter.pdf
• Resumen:
  La presente memoria de Tesis Doctoral estudia las interacciones del antihelmíntico triclabendazol (TCBZ) y sus metabolitos y el analgésico en desarrollo URB937 y sus análogos estructurales con el transportador ABCG2. Además, en el caso del URB937 y sus derivados se amplió el estudio a la glicoproteína P. ABCG2 se expresa en diversos tejidos del organismo presentando una función primordialmente protectora. Además, ABCG2 es el único transportador ABC cuya expresión se induce durante la lactación en la glándula mamaria, estando implicado en el paso de distintos compuestos hacia la leche, y es uno de los transportadores presentes en la barrera hematoencefálica restringiendo la entrada de fármacos hacia el SNC. Su función en ambas localizaciones se delimita a través de la búsqueda de compuestos que interactúen con él como sustratos o inhibidores. El triclabendazol es un fármaco muy utilizado en terapéutica veterinaria generalmente administrado de forma concomitante junto con otros fármacos. En este caso, estudiamos las interacciones farmacológicas mediadas por ABCG2 de los principales metabolitos del triclabendazol a nivel de glándula mamaria y en relación con la secreción de fármacos a leche. En cuanto al URB937 (analgésico en desarrollo) y sus análogos estructurales, nos hemos centrado en su interacción con ABCG2 y la glicoproteína P, otro transportador ABC, a nivel de la barrera hematoencefálica, donde ambos transportadores funcionan evitando la entrada de compuestos al cerebro. Así, los objetivos resumidos de la presente memoria consistieron por un lado, en el estudio de la capacidad inhibitoria in vitro del TCBZ y sus metabolitos (TCBZSO y TCBZSO2) sobre ABCG2 en distintas especies y el estudio in vivo del efecto de la coadministración del TCBZ y sus metabolitos sobre la farmacocinética y secreción en leche de varios sustratos en modelos animales. Por otro lado, determinamos tanto in vitro como in vivo si el analgésico en desarrollo URB937 es sustrato de ABCG2, así como la interacción in vitro de sus análogos estructurales tanto con ABCG2 como con la glicoproteína P. Para lograr nuestros objetivos hemos llevado a cabo diversos experimentos tanto in vitro como in vivo. Para los experimentos in vitro, hemos utilizado células epiteliales MDCKII transducidas con diversas variantes del transportador ABCG2 (murino, humano, ovino y dos variantes bovinas). Con estas células hemos realizado experimentos de reversión de la acumulación intracelular de mitoxantrona, un sustrato fluorescente de ABCG2 muy utilizado para estos estudios, y experimentos de transporte transepitelial de fármacos en placas Transwell. Así, hemos probado cómo los dos metabolitos del antihelmíntico triclabendazol (TCBZSO y TCBZSO2) eran capaces de inhibir a cada una de las variantes de ABCG2 a distintas concentraciones. Por otra parte, también comprobamos cómo la variante wild-type del transportador bovino es inhibida más eficazmente in vitro que la variante Y581S. En los experimentos de transporte transepitelial de fármacos utilizamos dos compuestos (nitrofurantoína y danofloxacina), fármacos muy utilizados como sustratos del transportador, y comprobamos cómo los metabolitos TCBZSO y TCBZSO2 eran capaces de revertir el transporte mediado por ABCG2. Por lo tanto, los estudios in vitro realizados identificaron al TCBZ y sus metabolitos como inhibidores de las diferentes variantes de ABCG2. Este tipo de experimentos in vitro se utilizaron también para confirmar la interacción del analgésico en desarrollo URB937 y sus análogos estructurales como sustratos de ABCG2 y de glicoproteína P. En cuanto a los experimentos in vivo, hemos utilizado modelos de ratones wild-type y knockout para el transportador Abcg2 y ovejas lactantes de raza Assaf. Así se ha determinado cómo los metabolitos TCBZSO y TCBZSO2 inhiben in vivo al transportador, aumentando los niveles en plasma del antiinflamatorio sulfasalazina y reduciendo los niveles en leche del antibiótico nitrofurantoína en ratones. Estos resultados se han corroborado en el caso de los experimentos con ovejas de producción lechera de raza Assaf, demostrando tras la coadministración con TCBZ, una reducción del 40% en la secreción en leche del endectocida moxidectina, sin verse afectados los perfiles plasmáticos. En el caso de la fluoroquinolona danofloxacina no se observó interacción con el TCBZ. Los estudios in vivo con URB937 realizados en ratones wild-type y knockout para Abcg2 demostraron que Abcg2 restringe el acceso de URB937 al sistema nervioso central sin afectar a sus niveles en plasma ni a su distribución y actividad en los tejidos periféricos. Las interacciones farmacológicas con el transportador de membrana ABCG2 descritas en la presente memoria permitirán un uso más seguro de la terapia antihelmíntica en medicina veterinaria y el desarrollo de nuevos analgésicos periféricos sin efectos adversos a nivel de sistema nervioso central.