Tesis doctorales: TESEO

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Ministerio de Educación, Cultura y Deporte - Gobierno de España

Título: ANÁLISIS MOLECULAR, MODIFICACIÓN FUNCIONAL Y PRODUCCIÓN DE ENZIMAS SUSCEPTIBLES DE SER UTILIZADAS EN LA SÍNTESIS DE FRUCTOOLIGOSACÁRIDOS
Autor: Lafraya Aguado, Alvaro
Universidad: Universitat de València (Estudi General)
Departamento: Medicina preventiva y salud pública, ciencias de la alimentación, toxicología y medicina legal
Fecha de Lectura: 21/06/2011
Programa de doctorado: Ciencia de los Alimentos, código 265D
Dirección:
- Polaina Molina, Julio (Director)
- MARÍN NAVARRO, JULIA VICTORIA (Codirector)
Tribunal:
- FONT PÉREZ, GUILLERMINA (presidente)
- DEL CASTILLO AGUDO, LUCAS (secretario)
- SANZ APARICIO, JULIA (vocal)
- MONEDERO GARCÍA, VICENTE (vocal)
- FERNANDEZ LOBATO, MARIA (vocal)
Descriptores:
- PROTEINAS
- BIOSINTESIS
- GLUCIDOS
- LEVADURAS
Localización: BIBLIOTECA FACULTAT DE FARMACIA, UNIVERSITAT DE VALENCIA (ESTUDI GENERAL)

2011lafraanali.pdf

Marcador: https://www.educacion.es/teseo/mostrarRef.do?ref=929973Añadir a favoritos.
Resumen:
Los fructooligosacáridos (FOS) son oligosacáridos lineales de cadena corta, de creciente importancia biotecnológica debido a su función como prebióticos. Se designan como prebióticos a determinados ingredientes no digeribles de los alimentos que ejercen un efecto positivo para la salud porque estimulan selectivamente el crecimiento o el metabolismo en el colon de determinados microorganismos de acción beneficiosa. Los FOS pueden obtenerse por hidrólisis parcial de polisacáridos (inulina o levano) o por síntesis enzimática a partir de sacarosa. Frecuentemente, las glicohidrolasas son capaces de catalizar tanto la hidrólisis de un enlace glicosídico como su formación, y su actividad en uno u otro sentido depende en gran medida de la conformación del centro activo y de las condiciones ambientales en las que actúen. Esta dualidad permite el uso de enzimas hidrolíticas en reacciones biosintéticas. En este contexto, la presente tesis ha cumplido un doble objetivo: 1) La identificación y caracterización de una nueva especie de levadura, Wickerhamomyces navarrensis, aislada de tierra asociada a raíces de plantas de ajo y cebolla, y que está dotada de una invertasa que es capaz de sintetizar FOS a partir de sacarosa mediante transfructosilación. 2) La ingenierización y el estudio estructural y funcional de la invertasa Suc2 de S. cerevisiae, consiguiendo mutantes de ésta con una mayor capacidad transfructosilante. Algunos de esos mutantes incrementaron la síntesis de 6-kestosa hasta en 12 veces respecto a la enzima nativa, sin afectar a la síntesis de otros FOS. Además, se ha identificado un residuo que modifica la especificidad de producto, ya que la enzima mutante sintetiza cantidades equimolares de 1-kestosa y 6-kestosa. Esto sugiere que el locus estructural ocupado por este residuo está involucrado en la orientación de la molécula aceptora y determina la especificidad de síntesis de enlaces ß(2-1) vs ß(2-6).

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